क्लासिक स्वाइन बुखार वायरस एंटीबॉडी एलिसा किट

विनिर्देश

 

 

परीक्षण प्रक्रिया और व्याख्या

 

चरण 1 परीक्षण प्रक्रिया

1.1 वॉश सॉल्यूशन की तैयारी

Wसंकेंद्रण एकाग्रता wAshing तरल:उपयोग से पहले, वॉश समाधान को कमरे के तापमान (20-25 डिग्री) पर बहाल किया जाना चाहिए और इसे समान बनाने के लिए समान रूप से हिलाया जाना चाहिए। फिर शुद्ध पानी के साथ केंद्रित धोने के घोल को 20 गुना पतला करें (उदाहरण के लिए, 5ml केंद्रित वाशिंग समाधान 95ml शुद्ध पानी में जोड़ा जाता है), अच्छी तरह से मिलाएं, और पतला धोने वाले तरल को 7 दिनों के लिए 2-8 डिग्री पर संग्रहीत किया जा सकता है।

1.2 नमूना तैयारी

① पूरे पशु रक्त को लिया गया, 10 मिनट के लिए 4000rpm पर सेंट्रीफ्यूग किया गया, और सतह पर तैरनेवाला एकत्र किया गया। सीरम को हेमोलिसिस के बिना स्वाभाविक रूप से समेटा जा सकता है।

② सीरम कमजोर पड़ने की प्लेट में 10 बार परीक्षण किए जाने वाले सीरम को पतला करें (उदाहरण के लिए: सीरम के 15ul को 135ul नमूना मंदक पर परीक्षण करने के लिए जोड़ें)।

नोट: नकारात्मक और सकारात्मक नियंत्रण को पतला नहीं किया जाना चाहिए।

1.3 परीक्षण प्रक्रिया

① एंजाइम लेबल माइक्रोप्लेट (नमूनों की संख्या के अनुसार, कई बार उपयोग किया जा सकता है और उपयोग किया जा सकता है), एंजाइम लेबल माइक्रोप्लेट में पतला सीरम के 100ul को जोड़ें, नकारात्मक नियंत्रण और सकारात्मक नियंत्रण के लिए प्रत्येक में दो कुओं को सेट करें, और 100ul जोड़ें, और 100ul को जोड़ें, और 100ul को सेट करें। क्रमशः प्रतिक्रिया अच्छी तरह से। प्लेट को कवर करने के लिए सीलिंग प्लेट फिल्म का उपयोग करके, और 30 मिनट के लिए 37 डिग्री पर ऊष्मायन का उपयोग करते हुए, नमूने को धीरे से हिलाएं।

② सीलिंग प्लेट फिल्म को बंद करें, प्लेट में समाधान को अच्छी तरह से हिलाएं, प्रत्येक कुएं में काम करने वाले एकाग्रता को धोने के 300 माइक्रोनल को जोड़ें, और फिर कुएं में तरल को छोड़ दें। उपरोक्त चरणों को 5 बार दोहराएं, और अंत में एक साफ शोषक कागज पर सूखा।

③ADD 100 ofl का एंजाइम प्रत्येक कुएं के लिए संयुग्मित करता है, प्लेट को कवर करता है, और 30 मिनट के लिए 37 डिग्री पर ऊष्मायन करता है।

④ सीलिंग प्लेट फिल्म को बंद करें, प्लेट में समाधान को अच्छी तरह से हिलाएं, प्रत्येक कुएं में काम करने वाले एकाग्रता को धोने के 300 माइक्रोनल को जोड़ें, और फिर कुएं में तरल को छोड़ दें। उपरोक्त चरणों को 5 बार दोहराएं, और अंत में एक साफ शोषक कागज पर सूखा।

प्रत्येक कुएं के लिए ⑤add 100 antl सब्सट्रेट समाधान, प्लेट को कवर करें और प्रकाश से 37 डिग्री पर 10 मिनट के लिए ऊष्मायन करें।

⑥ADD 50 andl प्रत्येक कुएं के लिए समाधान बंद करें, और 5 मिनट के भीतर परिणाम निर्धारित करें।

 

चरण 2 परिणाम व्याख्या

प्रत्येक कुएं का OD450 मान 96- अच्छी तरह से माइक्रोप्लेट रीडर पर पढ़ा गया था।

2.1 सत्यापन

औसत OD45 0 नकारात्मक नियंत्रण का एनएम मान <0 2 था। 2 और सकारात्मक नियंत्रण का औसत OD450NM मान 0.7 से अधिक या बराबर था, प्रयोगात्मक परिणाम मान्य थे। अन्यथा, परीक्षण को दोहराया जाना चाहिए।

2.2 गणना विधि

प्रत्येक नमूने के लिए, सही नमूने और नियंत्रण मानों का उपयोग करके एस/ पी की गणना निम्नानुसार करें:

2.3 परिणाम व्याख्या

जब s/p <0। 2, इसे नकारात्मक के रूप में आंका जाता है।

जब s/p> 0। 3, इसे सकारात्मक के रूप में आंका जाता है।

जब {{0}}।

 

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